Análisis directo de elementos metálicos en medio de cultivo celular mediante espectrofotometría de absorción atómica (AAS)

Introducción

Los ingredientes farmacéuticos activos (API) de los fármacos con anticuerpos se producen principalmente mediante el cultivo de células de CHO (ovario de hámster chino). En los últimos años, se ha informado que el metabolismo celular y la estructura primaria de los anticuerpos producidos en un medio de cultivo están influenciados por la composición de los nutrientes (azúcares, aminoácidos, etc.) y la concentración de elementos metálicos del medio. Por ejemplo, cuando están involucrados los elementos metálicos en el medio de cultivo, se ha observado que el zinc (Zn) actúa como cofactor para al menos 300 tipos de enzimas y factores de transcripción cuando se absorbe en las células (1), y los azúcares constituyentes de los glicanos unidos a los anticuerpos IgG cambian según la relación Mn/Zn en el medio de cultivo (2). Por lo tanto, el monitoreo de las concentraciones de elementos metálicos en el medio de cultivo se considera crítico para mantener la calidad uniforme en los fármacos con anticuerpos. Hasta ahora, las técnicas de ICP-MS y determinación de quelatos se habían utilizado en las mediciones de elementos metálicos en los medios de cultivo. Sin embargo, ICP-MS tiene altos costos iniciales/de ejecución, y la complejidad del método de determinación de quelatos es un problema, ya que la determinación de quelatos requiere un pretratamiento de las muestras para cada elemento a fin de coordinar los agentes quelantes (queladores) con una alta especificidad para los elementos diana. Por lo tanto, medimos los elementos metálicos en los medios de cultivo mediante espectrofotometría de absorción atómica (AAS), lo que permite un análisis sencillo y económico de los elementos metálicos. El contenido de este experimento se presenta a continuación.

1 de octubre de 2020 GMT