Sistemas HPLC/UHPLC/SFC

Principios clave de la tecnología HPLC

La HPLC es una técnica analítica que utiliza líquido para separar una mezcla de muestras en componentes individuales, de modo que puedan determinarse y registrarse en un cromatógrafo. La HPLC, una poderosa herramienta en química analítica, es un medio para obtener datos cuantitativos y cualitativos altamente sensibles y selectivos relativos a la estructura molecular de un compuesto diana y, como resultado, se utiliza con frecuencia en los campos de la medicina forense, los productos farmacéuticos, la seguridad alimentaria y las pruebas ambientales. Algunos de los componentes clave de los cromatógrafos son dispositivos dedicados para la separación molecular, conocidos como columnas, y bombas de alto rendimiento para suministrar solvente a un caudal estable. A medida que estas tecnologías han avanzado, la creación de HPLC, que también ofrece resultados de alta velocidad, ha permitido una mayor resolución y mayor precisión en el análisis de mezclas complejas.

¿Cómo funciona la cromatografía líquida de alta resolución?

El análisis mediante HPLC comienza con la preparación de una mezcla de muestras del material que se va a analizar. Existen dos fases de análisis mediante HPLC: la fase móvil y la fase estacionaria. La solución de muestra consiste en el líquido que es miscible con la solución de muestra que contiene el compuesto diana. La fase estacionaria es la parte de la columna que interactúa con el compuesto diana. La solución de muestra se inyecta en una columna de separación, también conocida como fase estacionaria, y luego en el detector a un caudal estable controlado por la bomba de suministro de solvente. Los compuestos contenidos en la muestra se separan en la columna antes de ser detectados por un detector. Una vez eluido (o retirado), cada compuesto se identifica y cuantifica en un cromatograma.

Características avanzadas de los sistemas de HPLC Shimadzu

Shimadzu es pionera en el avance de los sistemas de HPLC, liderando con precisión y eficiencia. Los sistemas de HPLC de Shimadzu son altamente confiables, y sus equipos son reconocidos por su rendimiento excepcional. Nuestras máquinas de HPLC son invaluables, porque están cuidadosamente diseñadas para aplicaciones amplias y operaciones fáciles. También son preciados por el arrastre ultrabajo, la reproducibilidad excepcional del área y la calidad superior de los datos, con soporte adicional de software, componentes y accesorios adaptados a las necesidades del usuario.

Volver a las aplicaciones de HPLC

Las aplicaciones de HPLC son muy amplias, ya que el nivel de análisis es increíblemente sensible, preciso y confiable. La HPLC es muy valiosa en los campos de la investigación clínica, la toxicología y la medicina forense, ya que puede detectar trazas de compuestos en sangre y orina. Las farmacéuticas, incluida la industria cosmética, encuentran que el análisis de HPLC es vital para evaluar la presencia de alérgenos y cuantificar con exactitud las estructuras moleculares de los productos. Del mismo modo, las empresas de alimentos y bebidas recurren a la HPLC para identificar los alérgenos y mantener la calidad y consistencia de los productos. Y, por su capacidad para calificar y cuantificar contaminantes y pesticidas, el análisis mediante HPLC es una herramienta poderosa utilizada por científicos ambientales. La gama de instrumentos de Shimadzu para aplicaciones específicas la encontrará aquí.

Selección de la columna de HPLC adecuada para su análisis

Elegir la columna de HPLC adecuada para su análisis depende de su objetivo. Las dimensiones de la columna de HPLC que elija se adaptarán mejor a ciertos resultados. Por ejemplo, si está buscando un análisis rápido, le conviene una columna de menor longitud en su instrumento de HPLC. Como alternativa, una columna de mayor longitud optimizará la resolución de los compuestos diana de los componentes. Si desea minimizar el consumo de solvente, elija una columna de HPLC con un diámetro interno más estrecho. Teniendo en cuenta sus objetivos de análisis, como el procesamiento de muestras, la resolución y los análisis bioquímicos deseados, puede determinar la columna de HPLC adecuada según sus necesidades.

Soluciones automatizadas con Analytical Intelligence de Shimadzu

Las innovaciones recientes de Shimadzu han permitido que los HPLC incorporen avances de vanguardia para permitir una mayor productividad y la máxima confiabilidad. Ahora, los instrumentos de LC de Shimadzu están equipados con funciones de Analytical Intelligence que permiten el soporte automático de muchas funciones que anteriormente requerían la atención del usuario. Por ejemplo, el inicio automático y la autopurga preparan el instrumento para la operación antes de que el analista ingrese al laboratorio, reduciendo así el tiempo del operador requerido para la preparación del instrumento y aumentando el rendimiento del instrumento. La función Flow Pilot aumenta gradualmente el caudal hasta que todo el sistema se calienta, lo que permitirá proteger valiosas columnas y ahorrar costos en la compra de consumibles de laboratorio costosos. La función de diagnóstico automático y recuperación automática detecta las fluctuaciones de presión, detiene el análisis y realiza la autopurga y la recuperación del sistema, lo que evita la pérdida de datos, el desperdicio de muestras y las ejecuciones repetidas que consumen tiempo. En resumen, las funciones de Analytical Intelligence permiten que los instrumentos Shimadzu se comporten como si fueran operados por un experto, lo que agiliza las operaciones y prioriza la eficiencia.

FAQ: Preguntas frecuentes

¿Qué es la HPLC y cómo funciona?

La HPLC es una técnica analítica que separa los compuestos disueltos en una muestra líquida. Permite el análisis cuantitativo de los componentes respectivos contenidos en la muestra.

¿Cuál es el principio de separación en la HPLC?

La HPLC busca separar compuestos en una solución de muestra en función de sus interacciones con una fase móvil, un líquido, y una fase estacionaria, un adsorbente sólido o una superficie recubierta de líquido de un material de empacado. La solución de muestra se inyecta en una columna de separación en la que se inmoviliza la fase estacionaria y luego se introduce en el detector a un caudal estable controlado por la bomba de suministro de solvente. Los compuestos contenidos en la muestra se separan en la columna antes de ser detectados por un detector y, una vez eluidos de la columna, cada compuesto se cuantifica en forma de cromatografía.

¿Qué columnas se utilizan en la HPLC?

Las columnas para HPLC se clasifican en las siguientes categorías:

• Columnas de fase normal: se utilizan para la separación de compuestos de baja polaridad, como esteroides y lípidos, que tienen una retención excesiva en el modo de fase inversa.
• Columnas de fase inversa: se utiliza para separar polímeros sintéticos y compuestos que van de moléculas pequeñas a medianas, incluidos productos farmacéuticos y péptidos.
• Columnas de exclusión por tamaño: se utiliza para separar biomoléculas grandes, incluidas las proteínas y los ácidos nucleicos.
• Columnas de intercambio de iones: se utilizan para separar iones inorgánicos o metálicos, así como compuestos orgánicos ionizables en función de su carga.
• Columnas para HILIC: una especie de columna de fase normal, utilizada para separar compuestos altamente polares, como azúcares y ácidos nucleicos, que son difíciles de retener en modo de fase inversa debido a la acción de la capa hidratada sobre la superficie.

¿Qué es cromatografía de fase inversa y HPLC HILIC?

Dependiendo de los compuestos analizados y los requisitos de separación del análisis, es posible que deba elegir entre columnas de fase inversa o columnas para HILIC. Si tiene como objetivo separar compuestos polares como azúcares y alcaloides, buscará la cromatografía HILIC, ya que los compuestos polares son más fácilmente retenidos por las fases estacionarias polares. Como alternativa, la cromatografía de fase inversa es ideal si su objetivo es separar mezclas con menos polaridad.

¿Cuál es la principal diferencia entre HPLC y UHPLC?

La UHPLC ofrece mayor eficiencia de separación basada en el tiempo que la HPLC. Esto se debe a que la UHPLC se puede operar a presiones más altas gracias a los tamaños de partículas más pequeños del material de empacado de la columna. Esto también permite reducir el uso de solventes.