Nexera Mikros - Características
Soporte para el sistema de Cromatografía líquida con espectrometría de masas con rango de micro caudal
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Límites de detección mejorados con microflujo
Alta sensibilidad bioanalítica
La sensibilidad sigue siendo un desafío para muchos metabolitos de la vitamina D, como 1,25(OH)2 di-hidroxivitamina D y 24,25(OH)2 di-hidroxivitamina D, porque carecen de grupos funcionales fácilmente ionizables y son de baja abundancia. Como se muestra a continuación, el análisis de LC/MS/MS microflujo de las soluciones estándar de los analitos de vitamina D mencionados anteriormente, produjo una mejora de tres a cinco veces en la relación señal/ruido en comparación con el análisis de semimicroflujo.
El aumento de la sensibilidad que se logra con LC/MS/MS microflujo, en comparación con el semimicroflujo, resultó en un aumento cinco veces mayor en la relación señal/ruido para verapamilo y un aumento cuatro veces mayor en la relación señal/ruido de Nor-Verapamilo.
Bioanálisis de anticuerpo monoclonal
- Nexera™ Mikros y Kit Anticuerpo BA nSMOL™ -
nSMOL (proteólisis limitada por la nano-superficie y la orientación molecular) es un proceso patentado e innovador que permite la proteólisis selectiva de la región Fab de anticuerpos utilizando nanopartículas inmovilizadas con tripsina. Los péptidos derivados de Fab se cuantifican mediante la medición de MRM en un espectrómetro de masas de alta sensibilidad. El sistema Nexera Mikros alcanzó intensidades de señal 12 veces más altas que con los caudales convencionales, con un límite inferior de detección correspondiente de 0.025 μg/ml y buena linealidad. El sistema Nexera Mikros es ideal para la cuantificación de bajo nivel de péptidos mediante LCMS.
El siguiente es un ejemplo de análisis de fármacos con anticuerpos en plasma. El plasma adicionado con trastuzumab se pretrató con el kit de Anticuerpo BA nSMOL.
En el análisis de péptidos insignia derivados de trastuzumab, Nexera Mikros proporciona un rango dinámico de 0.00763 - 62.5 μg/ml, buena linealidad con R2 > 0.99 y excelente precisión del 101.0 % (promedio).
La reproducibilidad intradiaria de este análisis de péptidos derivados de trastuzumab se resume en la tabla siguiente.
Estos resultados muestran una excelente reproducibilidad, con exactitud y precisión dentro del 20 % en el LLOQ y dentro del 15 %, incluso en otras concentraciones.
| Ajuste de concentración (μg/ml) |
QC conjunto1 ＊2 | QC conjunto2＊2 | ||
|---|---|---|---|---|
| Exactitud | Repetibilidad | Exactitud | Repetibilidad | |
| 0.00763 | 97.1 % | 5.69 % | 100 % | 11.3 % |
| 0.0229 | 102 % | 6.68 % | 101 % | 2.84 % |
| 5.86 | 106 % | 2.67 % | 99.4 % | 3.12 % |
| 50.0 | 94 % | 6.36 % | 91.7 % | 7.23 % |
Resultados de la evaluación de reproducibilidad intradiaria de las muestras de QC
*1: Esta curva se traza en escala logarítmica.
*2: QC conjuntos 1 y 2 se analizaron durante un periodo de 2 días, y cada conjunto de concentraciones se analizó cinco veces.
Resistencia incomparable del microflujo
Obtenga los beneficios del microflujo mientras disfruta de la reproducibilidad y la confiabilidad del HPLC
El sistema Nexera Mikros ofrece las mejoras que usted espera de un sistema de bajo flujo con la robustez del HPLC. Un blanco de plasma se precipitó con proteína, se diluyó (3x) y se inyectó 1,500 veces consecutivas. Durante las inyecciones consecutivas, la muestra de QC (40 puntos de nortriptilina) se inyectó una vez cada 50 inyecciones de solución en blanco de plasma. Las áreas de los picos y los tiempos de retención de la muestra de QC se representan a continuación. Con una repetibilidad del área de la RSD del 4.38 % y una estabilidad del tiempo de retención de la RSD del 0.25 %, se demostró un funcionamiento extremadamente estable, sin pérdida de la forma del pico común en los análisis de alto rendimiento de matrices complejas.
*Resultados obtenidos en nuestras condiciones de aplicación.
Funcionamiento sencillo y familiar
Fuente ESI Microflow robusta y fácil de usar
Fuentes Micro-ESI™
La fuente de LCMS Micro-ESI de Shimadzu ha sido diseñada para una sensibilidad y facilidad de uso óptimas. Una cámara de visualización y platina ajustable X-Y permite un fácil ajuste de la aguja de pulverización ESI. El horno de columna está montado en el LCMS para minimizar el volumen entre la salida de la columna y la aguja ESI.
La sonda Micro-ESI también cuenta con un ángulo de pulverización ESI optimizado para índices de microflujo, y está disponible para detección de masas de triple cuadrupolo, espectrometría de masas y espectrometría de masas de tiempo de vuelo cuadrupolo, respectivamente.
CTO-Mikros™ + UF-Link™: instalación fácil y confiable de la columna
El horno de columna CTO-Mikros está montado en la fuente Micro-ESI. Se garantiza una temperatura de columna estable, esencial para la reproducibilidad del tiempo de retención, y se pueden alojar columnas de hasta 150 mm de longitud. Para preservar el ajuste óptimo de la fuente, el CTO-Mikros cuenta con un innovador sistema de bloqueo de columna a presión, el UF-Link.
Cuando se utilizan tasas de microflujo, incluso el más pequeño volumen muerto puede causar una difusión significativa y provocar la pérdida de la forma y sensibilidad máxima. El UF-Link de Shimadzu permite a cualquier usuario instalar correctamente una columna de microflujo sin interrumpir la posición de la aguja de pulverización ESI. Un adaptador de sellado seguro permite que la columna se trabe en el horno y haga una conexión de volumen cero muerto con la aguja ESI. Se puede alojar cualquier columna de hasta 150 mm de longitud con accesorios estándar.
Procedimiento de conexión
Conecte el adaptador a la columna.
Las roscas estándar del adaptador lo hacen
compatible con una amplia variedad de
columnas.
Coloque la columna en el mecanismo UF-Link
dentro del horno.
Complete la conexión girándola
sobre la palanca.
LC-Mikros™: diseño innovador de la bomba de microflujo
Las bombas Shimadzu LC son el estándar de la industria para una larga vida útil y un alto rendimiento. La bomba de suministro de solvente LC-Mikros tiene un diseño de accionamiento directo completamente nuevo para administrar tasas de microflujo a semimicro que van de 1 a 500 μl/min. La tolerancia de presión del sistema UHPLC de 80 MPa (11,600 psi) permite el uso de todo tipo de columna.
La bomba LC-Mikros está diseñada para la elución de gradiente de microflujo, incluso en porcentajes bajos. En el siguiente ejemplo, se muestra una excelente estabilidad del gradiente utilizando composiciones de fase móvil que van del 1 % al 90 %. El LC-Mikros proporciona tiempos de retención estables esenciales para el cromatógrafo.
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Tiempo de retención
promedioDesviación
estándarRSD Gly-Tyr 5.31 0.009 0.16 % Val-Tyr-Val 7.97 0.006 0.07 % Angiotensina II 9.32 0.015 0.16 % Leu encefalina 9.71 0.011 0.11 % Met encefalina 10.5 0.012 0.11 % -
Caudal: 5 μl/min
Columna: Shim-pack MC C18 (0.3mmID×150 mm)
*Obtenido en nuestras condiciones especificadas.
| Tiempo (min) | 1 | 11 | 11.1 | 13 | 13.1 | 25 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Concentración B | 1% | 40 % | 90 % | 90 % | 1% | 1% |
SIL-40C XR: procesador de muestras automático de inyección directa de bajo volumen
El procesador de muestras automático SIL-40C XR le ofrece una excelente precisión y reproducibilidad, así como una transferencia extremadamente baja. Su volumen de inyección va de 0.1 a 50 μl y su valiosa muestra nunca se ha desperdiciado debido al método de inyección total adaptado a SIL-40C XR.
Contribuye a producir resultados altamente precisos incluso si usted tuvo que usar un volumen de inyección bajo (menos de 1 μl). En caso de microflujo con columna estrecha, también se reduce el volumen de inyección óptimo. También es difícil aumentar el volumen de inyección, especialmente, si usaría un solvente de muestra con alta potencia de elución. En este caso, la muestra debe diluirse para debilitar los solventes de la muestra. La capacidad de inyección de microvolumen altamente precisa del SIL-40C XR le permite usar muestras con alto contenido de solvente orgánico sin dilución.
El volumen del sistema y el retardo de gradiente se minimizan con el “mecanismo de corte del bucle programable” recién desarrollado, que desvía automáticamente el bucle de la muestra de la línea de flujo utilizando una válvula de alta presión tan pronto como se drena la muestra en la aguja. Esto es extremadamente importante para minimizar los tiempos de ejecución del análisis de microflujo.
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