Shim-pack serie UC (columnas SFC) - Características

Dado que la hidrofobicidad del dióxido de carbono supercrítico es similar al hexano, el comportamiento de separación primario de la SFC se considera generalmente similar al del modo de fase normal. Dependiendo de la fase estacionaria seleccionada, pueden producirse otras interacciones, como interacciones pi-pi o reacciones electrostáticas similares a las de la HPLC. Todos los tipos de columnas 20 se pueden usar para compuestos con polaridad aproximadamente neutral. La figura siguiente muestra cómo el comportamiento de retención puede variar significativamente según el tipo de fase estacionaria utilizada al analizar compuestos ácidos, neutros o básicos típicos. Se puede lograr una retención más fuerte seleccionando una fase estacionaria que se espera que interactúe con el compuesto diana.

Dado que la separación de fase normal es el modo de separación principal utilizado para la SFC, la UC-Diol y UC-Diol II de fase normal son las columnas utilizadas con más frecuencia. A estas les siguen las columnas UC-Py, que muestran un comportamiento similar al de las columnas a base de etilpiridina. SFC utiliza una mezcla de dióxido de carbono supercrítico y un modificador (un solvente orgánico como el metanol) independientemente de la fase estacionaria utilizada. Por lo tanto, se puede utilizar la misma composición de fase móvil para el análisis en serie a través de todas las columnas. La exploración de columnas es eficaz mediante el uso del siguiente conjunto de columnas 6, cada una de las cuales proporciona una selectividad de separación diferente.

Las columnas UC-Diol y UC-Diol II ofrecen una excelente aplicabilidad general para analizar una amplia variedad de compuestos, desde fosfolípidos y otros lípidos hasta compuestos peptídicos altamente polares. Sin embargo, se debe utilizar una columna con una fase estacionaria del grupo ODS, como la Shim-pack UC-ODS y la Shim-pack UC-GIS II, para separar los fosfolípidos por especies moleculares con parámetros modificadores similares.

Esto significa que puede ser posible separar isómeros y otros compuestos mediante SFC que son difíciles de separar mediante HPLC. Las columnas con modos de interacción específicos o múltiples pueden ayudar a mejorar la separación. UC-PolyBT, con su alta capacidad de reconocimiento plano, y UC-PBr, con su potencia de dispersión con Br, son útiles.

Las formas de pico mejoradas son el resultado de la supresión de la ionización de los compuestos diana y el enmascaramiento de grupos funcionales secundarios de fase sólida mediante la adición de ácidos, como ácidos fórmicos, y bases, como aminas. Por el contrario, durante la segmentación, puede ser preferible no usar agentes aditivos según el uso previsto de la segmentación. Con UC-PolyVP, en el que la poli(4-vinilpiridina) se une a un vehículo de gel de sílice, se puede obtener una buena forma de pico incluso sin la adición de ácidos o bases. Al analizar bloqueadores beta, que son compuestos básicos, se obtienen picos agudos incluso sin la adición de sales. Se cree que la poli(4-vinilpiridina), que está unida a la superficie del gel de sílice polar, contribuye a reducir las interacciones entre los silanoles residuales y los compuestos básicos.

Generalmente, se utilizan diferentes métodos de separación para los ácidos grasos, que normalmente se analizan mediante GC, y los glicéridos, que normalmente se analizan mediante HPLC. Sin embargo, debido a que el dióxido de carbono supercrítico tiene propiedades similares al hexano, la SFC es muy adecuada para analizar compuestos con baja polaridad. Las columnas UC-HyP se pueden utilizar para analizar simultáneamente todo, desde ácidos grasos hasta glicéridos.

Los compuestos altamente polares, como los aminoácidos, se pueden analizar seleccionando una fase estacionaria y un modificador adecuados. Al utilizar una columna UC-Amide, los aminoácidos pueden analizarse sin el tiempo y los problemas de derivatización.

Las HAP contienen múltiples isómeros, como el antraceno y el fenantreno, que no pueden separarse con un espectrómetro de masas. Por lo tanto, deben separarse mediante cromatografía. Las cinco combinaciones de isómeros se pueden separar utilizando una columna UC-Choles. La estructura rígida de fase estacionaria del grupo colesterilo es eficaz para resolver compuestos planos similares.