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Kit de anticuerpo BA para nSMOL

Kit de preparación de muestras para LC/MS/MS para análisis cuantitativo de anticuerpos monoclonales

Bioanálisis de anticuerpos monoclonales nSMOL

nSMOL (proteólisis limitada por la nano-superficie y la orientación molecular) es la técnica innovadora patentada de Shimadzu que permite la proteólisis selectiva de la región Fab de anticuerpos monoclonales. El Kit de anticuerpos BA nSMOL es un kit de reactivos listo para usar para la recolección de anticuerpos monoclonales de sangre u otras muestras biológicas, utilizando resina de recolección de inmunoglobulinas y luego realizando proteólisis selectiva de la región Fab de estos anticuerpos a través de nanopartículas inmovilizadas con tripsina. Los péptidos derivados de región variable producidos por proteólisis limitada pueden cuantificarse posteriormente mediante mediciones MRM utilizando un cromatógrafo de líquidos y espectrómetro de masas de triple cuadrupolo LCMS-8050/8060 de alto rendimiento. El flujo de trabajo rápido y conveniente sin igual que proporciona el Kit de anticuerpos de BA nSMOL mejora considerablemente la productividad y la solidez del bioanálisis de anticuerpos monoclonales mediante LCMS.

 
  • Desarrollo de métodos más rápido y menos costoso
    Mejora drásticamente la respuesta y la repetibilidad cuantitativa. No se requieren anticuerpos de captura ni ligandos.

  • Proteólisis nSMOL
    Recolección selectiva de péptidos Fab. Limita la contaminación por exceso de péptidos o tripsina.

  • Rendimiento
    Es posible realizar ensayos sumamente sensibles y exactos para una variedad de anticuerpos.

  • Altamente versátil
    Se aplica a una amplia variedad de anticuerpos farmacéuticos.

 

Flujo de trabajo simple

Este kit posibilita datos altamente reproducibles y evita los problemáticos pasos de desnaturalización, reducción y alquilación normalmente asociados con la digestión de proteínas. Tampoco es necesario extraer la fase sólida después de la reacción. Después de la preparación de la nSMOL, las muestras pueden inyectarse directamente en el LCMS.

Contenido del kit

El Kit de anticuerpos BA nSMOL proporciona reactivos preparados y protocolos para la preparación de muestras a través del método nSMOL.

Especificaciones del producto

 
Elemento Especificaciones
Objetivos de detección Anticuerpos monoclonales en suero o plasma (incluidos los fármacéuticos con anticuerpos)
Número de mediciones 100 ensayos
Volumen aproximado de la muestra 90 μl (antes de la inyección de LCMS)
Temperatura de almacenamiento Se especifica para cada reactivo
Fecha de caducidad 18 meses a partir de la fecha de envío si no se abre y se almacena a 4 °C
(*Para FG BeadsTM Trypsin DARTTM, 18 meses a partir de la fecha de envío si se almacena a -80°C)

Configuración del producto

 
Reactivo Cantidad Capacidad Temperatura de almacenamiento
Resina de recolección de inmunoglobulina 2 1.3 ml/cada uno 4 °C
Lavado (unión) Solución 1 1 80 ml 4 °C
Solución de lavado 2 1 80 ml 4 °C
Solución de reacción 1 10 ml 4 °C
Solución de reacción mejorada 1 Liofilizado 4 °C
Solución para detener la reacción 1 1 ml 4 °C
FG Beads™ Trypsin DART™ 1 1.1 ml -20°C*1

*1 Si se almacena durante un mes o más, guárdelo a -80 °C.

Los siguientes consumibles se compran por separado.

 
Consumibles especificados Fabricante N/P
Tubo conector de reactivo nSMOL SHIMADZU 225-32260-91
225-32260-92
Ultrafree-MC, GV 0.22 μm Merck Millipore UFC30GV00
UFC30GVNB
Microtubo de 2 ml, PP SARSTEDT 72.708

Nota: para conocer otros equipos necesarios, consulte el manual de instrucciones.

Artículos recomendados

Consulte las especificaciones recomendadas y los productos de referencia en la siguiente tabla, y realice las preparaciones correspondientes.

 
Artículos requeridos Especificaciones recomendadas Productos de referencia
Filtro de filtración de 5 μm Prepare una jeringa y un filtro de jeringa con un tamaño de poro de 5 μm.
Millex-SV 5.0 μm, PVDF, 25 mm,
Carcasa de PVC, no estéril,
SLSV025NB, Merck Millipore
Filtro de filtración de 0.8 μm Prepare una jeringa y un filtro de jeringa con un tamaño de poro de 0.8 μm. Unidad de filtro de jeringa Millex-AA, 0.80 μm,
ésteres de celulosa mixtos, 25 mm, carcasa de PVC no estéril,
SLAA025NB, Merck Millipore
Tubo de muestras de 2 ml ・Polipropileno
Tubo inferior redondo
Nombre del artículo: Tubos de seguridad
N/P:0030 120.094
Vendido por: Eppendorf
Mezclador de microtubos ・Se usa a temperatura ambiente o a 50 °C.
・Se puede instalar dentro de la incubadora.
・Juego disponible con un tubo de 1.5 ml, un tubo de 2.0 ml y un tubo con filtro.
Nombre del artículo: Mezclador de microtubos
Modelo: MT-400
Vendido por: Tomy Seiko Co., Ltd
Incubadora ・Incubadora con un humidistato o una incubadora en la que se pueda colocar una bandeja llena de agua a fin de mantener la presión del vapor de saturación
・Lo suficientemente grande como para poder instalar el mezclador de microtubos mencionado anteriormente
Nombre del artículo: Incubadora con congelador
Modelo: MIR-254-PJ
Vendido por: Panasonic Healthcare Co., Ltd.
Micro pipeteador, punta Punta sin plastificante para evitar la contaminación del plastificante en el MS (incoloro) (1) Nombre de la marca: Rainin Vendido por: Mettler Toledo
(2) Nombre de la marca: Biohit Vendido por: Sartorius
Centrífuga de escritorio Capaz de centrifugar tubos de 1.5 ml, tubos de 2.0 ml y tubos de filtro a 10,000 μg y 12,000 μg Nombre de la serie de productos: Microcentrífuga de alta velocidad de la serie MX
Vendido por: Tomy Seiko Co., Ltd
Soporte para tubo magnético Capaz de separar magnéticamente las microesferas de FG DART de tripsina Nombre del artículo: Soporte magnético
Modelo:TA4899N12
Vendido por: Tamagawa Seiki Co., Ltd.
Viales de LCMS Tipo de baja adsorción, o viales sin plastificante Nombre del artículo: TORAST-H Bio Vial N/P: GLCTV-H-BIO Nombre del artículo: TORAST-H Bio Vial N/P: GLCTV-H-BIO
Vendido por: Shimadzu GLC
Columna de análisis Capaz de separar y analizar péptidos

Nombre del artículo: Shim-pack GISS
Diám. interno 2.1 mm × largo 50 mm,
tamaño de partícula 1.9 μm
N/P: SSOT 227-30048-01
Vendido por: Shimadzu Corporation

Solución estándar interna Capaz de corregir la sensibilidad y el tiempo de retención Nombre del artículo: ProteoMass P14R MALDI-MS estándar
Núm. de catálogo:P2613
Vendido por: Sigma-Aldrich

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