Paquete de métodos LC/MS/MS para perfil de azufre reactivo
Para LabSolutions™ LCMS
Protocolos de pretratamiento de muestras y métodos analíticos para 17 metabolitos que contienen azufre, incluidas las especies reactivas de azufre
El estrés oxidativo y la posterior degradación de las moléculas biológicas relacionadas con diversas especies reactivas de oxígeno es un campo importante de la investigación clínica. Recientemente, una amplia investigación del metaboloma de azufre realizada por el profesor Takaaki Akaike et al. de la Escuela de Graduados de Medicina de la Universidad de Tohoku ha demostrado que la cisteína persulfuro y otras especies reactivas de azufre desempeñan un papel importante en la defensa biológica y los sistemas de respuesta antioxidante. Las especies reactivas de azufre se encuentran en cada órgano del cuerpo, incluido el cerebro, el corazón y el hígado, e incluso se encuentran en la sangre de personas sanas. Los investigadores están investigando la función de estos compuestos en relación con el envejecimiento y las afecciones asociadas con el estrés oxidativo, como las enfermedades respiratorias, las enfermedades cardiacas y el cáncer.
Este paquete de métodos de LC/MS/MS para perfilar el azufre reactivo ofrece métodos analíticos para LC/MS/MS que apuntan a los 17 metabolitos que contienen azufre, incluidas las especies reactivas de azufre, con condiciones de separación y parámetros de MS que están optimizados para cada compuesto. También viene con ejemplos de protocolos de pretratamiento, incluidos los pasos de derivatización, para muestras biológicas que contienen células y plasma sanguíneo. El paquete de métodos permite al usuario analizar los metabolitos que contienen azufre sin necesidad de una investigación prolongada de la preparación de las muestras y las condiciones analíticas. El paquete de análisis multiómico Shimadzu también ofrece una herramienta para visualizar resultados cuantitativos obtenidos con este paquete de métodos. La herramienta ayuda a los usuarios a interpretar los resultados al proporcionar pantallas gráficas fáciles de entender de las relaciones y proporciones entre los componentes metabólicos en diferentes conjuntos de muestras.

Parámetros de LC optimizados para el análisis de 17 metabolitos que contienen azufre
Los métodos analíticos convencionales tienen problemas con el análisis simultáneo de glutatión reducido y oxidado, y cisteína y cistina, debido a sus diferentes polaridades y compuestos con diferentes cantidades de átomos de azufre. Cuando este paquete de métodos se combina con una columna PFPP y parámetros de LC optimizados, los efectos de la matriz se reducen mientras el análisis se lleva a cabo en aproximadamente 17 minutos.
Parámetros de MS/MS que permiten determinar las cantidades relativas
Las especies reactivas de azufre representan un desafío significativo para el análisis cuantitativo debido a su inestabilidad y la dificultad de obtener estándares de referencia. Los métodos incluidos en este paquete de métodos ajustan los parámetros de la MS para que las intensidades de cada componente dentro de un grupo sean aproximadamente equivalentes para una concentración dada. Esto permite determinar con precisión las cantidades relativas de componentes dentro de cada grupo en un amplio rango dinámico. Además, se adopta un método estándar externo con estándares fácilmente disponibles, como cisteína y glutatión, para permitir el cálculo de las cantidades absolutas para los componentes sin estándares fácilmente disponibles.
* La escala de las intensidades pico cambia según si se utiliza ajuste de parámetros o no.
Ejemplos de protocolos de pretratamiento para muestras de plasma celular y sanguíneo: estabilización de especies reactivas de azufre
Entre los metabolitos que contienen azufre, las especies reactivas de azufre reducidas son extremadamente inestables y las muestras que las contienen requieren protocolos adecuados previos al tratamiento que incluyen pasos de derivatización. El manual de instrucciones de este paquete de método incluye ejemplos de protocolos de pretratamiento para muestras de células y plasma sanguíneo que contienen especies reactivas de azufre.
Visualización de resultados cuantitativos

El paquete de métodos incluye un mapa en blanco compatible con el paquete de análisis multiómico Shimadzu para visualizar resultados cuantitativos. Este mapa en blanco ayuda a interpretar los resultados cuantitativos al proporcionar una representación visual fácil de comprender de las relaciones metabólicas y las relaciones entre cada componente en metabolitos que contienen sulfuro, así como las diferencias entre grupos de muestras.
* El paquete de análisis multiómico se vende por separado.
LabSolutions es una marca comercial de Shimadzu Corporation o sus empresas afiliadas en Japón o en otros países.
Notas
1. Se requiere LabSolutions™ LCMS version5.114 o posterior. 2. Este paquete de métodos es para fines de investigación.
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